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受激發射損耗(STED)顯微鏡原理(lǐ)
時(shí)間(jiān):2023-08-03 15:38來(lái)源:訊技(jì)光電(diàn)作(zuò)者: 技(jì)術(shù)部點擊:打印
摘要


                                                                   
受激發射損耗(STED)顯微鏡描述了一種常用的技(jì)術(shù),以實現在生(shēng)物應用的超分辨率。在這種方法中,兩束激光—一束正常,一束轉變成甜甜圈模式—被疊加到熒光樣品上(shàng)。通(tōng)過使用熒光過程的發射和(hé)損耗以及利用由此産生(shēng)的飽和(hé)效應,與通(tōng)常的顯微鏡技(jì)術(shù)(例如,寬視(shì)場(chǎng)顯微鏡)相比,後反射光顯示出更高(gāo)的分辨率。在本文檔中,介紹了這種設備的基本設置。為(wèi)了模拟飽和(hé)效應,在焦點區(qū)域采用等效孔徑。
 
任務說明(míng)                                                                           

 
多(duō)重光源                                                                           
   

 
螺旋相位闆                                                                           

 
探測器(qì)插件                                                                           

 
參數(shù)運行(xíng) 

                                                                         
 
為(wèi)了實現焦點區(qū)域的z-掃描,可(kě)以執行(xíng)參數(shù)運行(xíng)。使用此工具,用戶可(kě)以輕松改變整個(gè)光學系統的單個(gè)參數(shù)或一組參數(shù)。有(yǒu)關詳細信息,請(qǐng)參閱:
 
Usage of the Parameter Run Document
                                                                                
非時(shí)序建模

                                                                       
 
将通(tōng)道(dào)配置模式切換設置為(wèi)Manual Configuration後,用戶可(kě)以為(wèi)系統中的每個(gè)表面指定為(wèi)模拟打開(kāi)哪些(xiē)通(tōng)道(dào)。運行(xíng)模拟時(shí),将對活動光路進行(xíng)初步分析(通(tōng)過所謂的Light Path Finder)。然後引擎将沿着這些(xiē)光路将場(chǎng)追蹤到系統中存在的探測器(qì)。
 
Channel Setting for Non-Sequential Tracing
                                                                                
總結 – 組件…           

                                                            


 
系統觀感

                                                                 
 
 
發射&損耗激光 

                                                                        
 
光在焦點區(qū)域中的傳播表明(míng),來(lái)自損耗激光的光會(huì)産生(shēng)環形光斑,其中中心孔徑小(xiǎo)于發射激光的焦斑。由于兩個(gè)光束在目标上(shàng)的熒光過程中競争,這導緻信号激光的有(yǒu)效光束尺寸更小(xiǎo)。
 
                                                                                
3D STED 輪廓

               
                                                     
注意:由于這個(gè)簡化的例子不包括實際的熒光效應,我們為(wèi)了可(kě)視(shì)化目的對兩個(gè)激光束進行(xíng)了歸一化。
 
受激發射損耗效應                                                                          
 
為(wèi)了近似飽和(hé)損耗的影(yǐng)響,我們在焦點位置對發射激光的結果應用了孔徑效應。孔徑的參數(shù)大(dà)緻基于損耗激光的焦點輪廓(600nm 直徑,25% 邊緣)。通(tōng)過系統傳播回探測器(qì)平面表明(míng),由于這個(gè)過程,光斑變得(de)非常小(xiǎo)。


 
VirtualLab Fusion 技(jì)術(shù)                                                                          

                                                                                
文件信息 


 
進一步閱讀
• Simulation of Multiple Light Source in VLF
• Focusing of Gaussian-Laguerre Wave for STED Microscopy
 
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